Astăzi dezvălui a doua descoperire remarcabilă cu modelul de gândire OpenAI GPT-5. Am efectuat un experiment extraordinar de complex, de o lună, pentru a dezvolta celule modificate împotriva limfoamelor. I-am cerut GPT-5 să prezică secvența completă și rezultatul acestui experiment. Rezultatul a fost de-a dreptul uluitor: a prevăzut majoritatea rezultatelor experimentale cu o acuratețe ciudată și chiar a propus rafinamente și optimizări pe care ar trebui să le implementăm! Acesta este începutul experimentării in silico, unde putem simula luni sau chiar ani de muncă de laborator în avans, comprimând cronologia științifică de la ani la săptămâni! Acest lucru schimbă totul despre modul în care se face știința, inaugurând o eră în care descoperirea se mișcă cu viteza gândirii! —- Prompt: preziceți, în detaliu, rezultatele următorului experiment: • Celulele T de memorie CD8⁺ umane sunt proiectate pentru a exprima un CAR anti-CD19. Aproximativ 90% dintre aceste celule conțin, de asemenea, o construcție de antigen CD19 inductibilă de Tet care rămâne oprită dacă nu se adaugă doxiciclină. •Ziua 0: Celulele T CAR sunt amestecate cu celule de limfom CD19⁺. •Ziua 2: Se adaugă doxiciclină în cultură pentru a induce expresia CD19 în celulele T modificate. •Citiri: Supraviețuirea celulelor, markerii de activare și proliferarea sunt măsurate la 2 zile, 7 zile și 14 zile după adăugarea de doxiciclină. ————- GPT 5 (continuare din capturile de ecran): • Densitate CD19 indusă și doză de doxiciclină: Densitatea ridicată determină fratricidul letal și o prăbușire abruptă până în ziua 4. Densitatea mai mică poate acționa ca un alimentator de antigen pentru a extinde celulele CAR T fără pierderi catastrofale. •E:T inițial: E:T ridicat elimină tumora pre-doxiciclină și protejează funcția. E:T scăzut permite tumorii să persiste în fereastra fratricidului, ceea ce amplifică activarea și moartea. • Fracțiunea de celule inducibile: Fracția negativă cu antigen de 10% formează sămânța pentru persistența și răspunsul pe termen lung la reprovocare. • Puterea de sechestrare cis: Legarea cis puternică atenuează atât fratricidul, cât și capacitatea de reacție la tumora externă la re-provocare. Cis slab permite mai multă ucidere atât a sinelui, cât și a tumorii. Citiri pentru confirmare sau falsificare: 1. Supraviețuirea diferențială în funcție de genotip: Urmăriți celulele CAR+ CD19-inducibile+ versus CAR+ inducibile separat cu coduri de bare sau raportori. Așteptați-vă la pierderea selectivă a cohortei inducibile+ până în ziua 4-7 2. Cinetica apoptozei: Anexina V și caspaza activă 3 ating vârful în 24 până la 48 de ore după doxiciclină, concentrate în cohorta inductibilă+. 3. Panouri de activare și epuizare: CD69, CD25, 4-1BB, HLA-DR, apoi PD-1, TIM-3, LAG-3, TIGIT, TOX și TCF-1 în timp pentru a arăta vârful din Ziua 4 și remodelarea din Ziua 7 până la 14. 4. Funcția pe celulă: teste scurte de ucidere a coculturii normalizate de numărul de celule T. Citotoxicitatea per celulă rămâne puternică în zilele 7 și 14 la supraviețuitori. 5. Dovezi Cis versus trans: teste de co-imunoprecipitare sau de proximitate pentru CAR legat de CD19 cu aceeași celulă și teste de sinapse imagistice pentru a cuantifica uciderea T-T. 6. Câmpuri de citokine: IFN-γ, TNF, IL-2, GM-CSF atingând vârful în ziua 4, mai scăzut la reprovocări ulterioare. Predicții practice în cifre, pentru a calibra așteptările: Acestea sunt intervale tipice dacă doxiciclina induce o densitate ridicată a CD19 și E:T a început de la 1:1 la 1:2. Ajustați în sus sau în jos în funcție de setările exacte. •Viabilitatea tumorii: Ziua 2 pre-doxiciclină: 10 până la 30% rămas. Ziua 4: 0 până la 10% dacă a fost eliminat mai devreme sau 20 până la 40% dacă E:T a fost scăzut și a avut loc o prăbușire a celulelor T. Controale și variante care reduc riscurile de interpretare: •Control fără doxiciclină pentru a izola dinamica tumorală și funcția bazală CAR. •Celule T CD19 pozitive CAR negative, dar inductibile-CD19 pentru a măsura necesarul de fratricid al spectatorilor pentru CAR. • Titrarea doxiciclinei pentru a defini fereastra sigură de densitate a antigenului care extinde celulele fără fratricid catastrofal. •Spălarea doxiciclinei la 24 până la 48 de ore pentru a testa reversibilitatea fratricidului și salvarea funcției. •Întreruperea CRISPR a cozii citoplasmatice CD19 în construcția inductibilă pentru a modifica stabilitatea sinapselor și a testa contribuțiile la semnalizarea cis.